酶標(biāo)分析儀檢定規(guī)程是怎樣的？
作者：admin 時間：2021-06-01 01:16:54 點擊次數(shù):1928
酶標(biāo)分析儀在實驗室中的應(yīng)用越來越普及，酶標(biāo)分析儀的驗證也越來越重要。酶標(biāo)分析儀的檢定內(nèi)容主要包括干擾濾波器波長誤差和重復(fù)性、吸光度誤差、穩(wěn)定性和重復(fù)性、儀器靈敏度、通道差和吸光度線性。下面山東萊恩德智能科技小編就這幾項在實驗測定時的要求給大家介紹下：
一、吸光度示值穩(wěn)定性(r)的檢定：
選用492nm波長或儀器特有的專一波長，將吸光度標(biāo)稱值為1.0A的光譜中性濾光片，平放在微孔酶標(biāo)板的空板架上，以空氣為參比，測量并記錄酶標(biāo)儀的初始吸光度示值(A0)，5min、10min后分別再測一次。吸光度示值穩(wěn)定性(r)計算：r等于后兩次吸光度示值的Zda值與A0的差。
二、波長示值誤差和波長重復(fù)性的檢定：
從酶標(biāo)儀取出儀器所用有標(biāo)稱波長(λ)的干涉濾光片(405，450，492，620nm)，使用波長示值誤差優(yōu)于±0.5nm的分光光度計，將干涉濾光片用1mm左右銅或鋁金屬絲懸掛固定于分光光度計比色杯架第二孔右外側(cè)，干涉濾光片平面需與入射光束垂直。以1nm的改變幅度，從低到高，檢測各干涉濾光片在(±20)nm范圍內(nèi)的透射比，繪制波長一透射比特性曲線，求出峰值波長(λi)，每片干涉濾光片重復(fù)檢測三次并求峰值波長均值。
干涉濾光片波長示值誤差(△λ)計算：△λ=峰值波長均值-λ;波長重復(fù)性(δλ)計算：δλ等于三次檢測峰值波長Zda值和Z小值之差。
三、吸光度示值誤差的檢定：
先將吸光度標(biāo)稱值(A)分別為0.2，0.5，1.0，1.5的四塊光譜中性濾光片(分光光度計附件)，在分光光度計上依次選用405，450，492，630nm波長或酶標(biāo)儀特有的專一波長，以空氣為參比，檢測光譜中性濾光片的吸光度。每個濾光片每個波長檢測三次，取均值作為該片在該波長下的吸光度標(biāo)準(zhǔn)值(As)。然后，將四塊光譜中性濾光片同時平放在微孔酶標(biāo)板的空板架上，以空氣為參比，酶標(biāo)儀連續(xù)測量3次，依次記錄儀器吸光度示值，并計算平均值(Ax)。
吸光度示值誤差(△A)計算：△A=Ax-As，取計算后的所有△A中的誤差Zda值作為該酶標(biāo)儀的吸光度示值誤差。
四、吸光度重復(fù)性的檢定：
按吸光度示值計算的方法將吸光度標(biāo)稱值(A)為0.5或1.0光譜中性濾光片，以空氣為參比，于酶標(biāo)檢測儀微孔酶標(biāo)板的空板架某一固定孔位重復(fù)測定6次(n)，記錄每一次吸光度(Xi)，求吸光度均值，按下式計算RSD偏差值(RSD)，以RSD表示儀器吸光度重復(fù)性。
五、靈敏度檢定：
選用450nm波長或儀器特有的專一波長，使用量程適合并檢定合格的A級加樣器，在未包被的空板條某一孔加入200μl含鉻量為5mg/L的重鉻酸鉀溶液，測量并記錄吸光度值(Am)，此吸光度值即為酶標(biāo)儀靈敏度。
六、通道差異檢定：
多通道酶標(biāo)儀選用450nm波長或儀器特有的某一波長，將吸光度標(biāo)稱值為1.0A光譜中性濾光片置于空板架上，以空氣為參比，依次檢測該濾光片在各通道的吸光度。通道差異(δA)計算：δA等于所有通道檢測吸光度中Zda值和Z小值的差。
七、線性驗證：
將含鉻量為700mg/L的重鉻酸鉀溶液和0.05mol/L的硫酸溶液按比例(0：7，1：6，2：5，3：4，4：3，5：2，6：1，7：0)配成不同稀釋度的系列溶液共8管，每管取200μl加入未包被的空板條微孔，以450nm/630nm雙波長檢測吸光度，重復(fù)測定兩次取均值，進(jìn)行回歸分析，計算相對標(biāo)準(zhǔn)估計誤差(Sy,x)。
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